western blot检测蛋白表达（western blot）

你们好，最近小活发现有诸多的小伙伴们对于western blot检测蛋白表达，western blot这个问题都颇为感兴趣的，今天小活为大家梳理了下，一起往下看看吧。

1、 什么是Westernblot？Westernblot是一种将电泳和KIJSA结合起来的技术，分为电泳、转印和酶免疫分析三个阶段。

2、 Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫分析的高灵敏度和特异性，是一种可用于分析样品成分的免疫学测定方法。

3、 Westernblot的应用：Westernblot是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法，是一种对蛋白质进行定性和半定量分析的方法。

4、 特异性抗体用于对经凝胶电泳处理的细胞或生物组织样品进行显色，通过分析显色位置和显色深度获得被分析细胞或组织中特定蛋白质的表达信息。

5、 蛋白质分析中使用的Western杂交方法类似于DNA分析中使用的Southern杂交方法，后者将电流分离的组分从凝胶转移到固体支持物上。

6、 为特定氨基酸(Westernblot)或核苷酸(Southern杂交)序列制备的特定样品被用作检测相同或相似序列的探针。对于蛋白质，常用的探针是抗体。

7、 它与附着在固体支持物上的靶蛋白的表位特异性反应。Westernblot方法的主要优点是可以从生物组织的粗提物或部分纯化的粗提物中检测和鉴定几种特定的蛋白质。

8、 用电将聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)分离的蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶转移到合适的印迹膜上，然后结合到膜上的一种或几种蛋白质被与灵敏的检测系统偶联的抗体识别。

9、 这种技术的灵敏度可以达到标准固相放射免疫分析的水平，而不需要像Jun免疫沉淀那样对目标蛋白进行放射性标记。因此，当鉴定和定量由非放射性标记蛋白质组成的复杂混合物中的某些特定蛋白质时，

10、 蛋白质印迹法非常有用。此外，由于蛋白质的电泳分离几乎总是在变性条件下进行，所以不需要考虑许多问题，例如目标蛋白质和外源蛋白质的溶解、聚集和共沉淀。

11、 bole Life bio-rad Trans-Blot Trans-Blot transfer tank是一种多功能仪器，适用于许多蛋白质印迹应用。可以灵活设置多组参数，

12、 可调电压设置(从30V的隔夜转移到200 V的1小时快速实验)。标准转印的电极间距设置为8厘米，高强度转印的电极间距设置为4厘米。

13、 采用超冷芯和水循环冷却装置调节温度——是天然酶(4)或高强度转移的理想选择，不会随着转移时间的增加(最长24小时)造成缓冲液耗竭。

以上就是western blot这篇文章的一些介绍，希望对大家有所帮助。

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